作者Peetu (Peetu)
看板Biotech
标题[讨论] HPLC更改条件会影响积分面积吗?
时间Tue Oct 27 23:44:20 2015
今天跑HPLC时，打了标准品 (天然活性物的标准品)
发现更改分析条件，例如MP比例、温度，都不太会影响积分面积的数值
只有更改流速时，积分面积会变动 (所有条件下都不更动，只有调流速)
例如原本流速为1.0，分析出来的数值是10000
变更为0.5，分析出来的数值就会变成20000
想讨论一下这是什麽原因造成的呢?
我的想法是:
一般来说纯度高的单一sample打到column後，就会集中在一点
按照与column和MP的分配系数，来决定RT，一起冲出column後，由侦测器读出数值
k = stationary phase/mobile phase，因此降低流速只是影响k值变小而已，提高RT
但应该不会影响侦测器的判读，因为sample是一起被冲出column
因为column容积是相同的，不会因为流速提高，
导致column内体积增加，进而稀释掉sample吧?
HPLC: waters
column: RP C18 5uM
MP: ACN/Formic acid/water
detector: PDA
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→ hsnuconan:这世界上只有10种人 懂二进位的和不懂二进位的 10/27 00:13
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1F：推 DrPiGu: 理论板数.. 11/01 00:25
是否能详细说明呢?
※ 编辑: Peetu (114.35.44.89), 11/03/2015 00:51:27