作者charlene822 (是喔)
看板Biotech
标题[求救] 有关LC MS/MS的样品制备
时间Mon Nov 2 15:14:59 2015
简单叙述一下我的实验
实验室研究的某个A蛋白正常为monomer形式存在
但加入了B药物後会随着药物浓度增加渐渐形成dimer
而我想经由Mass知道他形成dimer是哪些胺基酸的片段或位置影响的
就我所知可以利用trypsin来做水解特定胺基酸的处理後再上机分析
我想请教的是:我们实验室是用column纯化出来的蛋白 需要跑胶处理还是直接可以用纯化
後加药的蛋白来做比较?
如果是的话蛋白浓度以及怎麽加入trypsin处理 还有trypsin的量要加多少?
小弟对於这方面一无所知 有劳各位大大救命了 感激不尽
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1F：推 littleable: 不管是monomer还是dimer,trypsin都会切 11/03 19:47
2F：→ littleable: 要怎麽找binding的位置呢?请赐教!!谢谢!! 11/03 19:48
3F：推 dehydrogenas: Protein:Trypsin 1:50 11/04 14:02
4F：→ dehydrogenas: 样品在gel里就做in-gel digest 在solution里就做 11/04 14:02
5F：→ dehydrogenas: in-solution digest 11/04 14:03
6F：→ dehydrogenas: 样品会形成dimer一般都是双硫键较多 到时候就看转 11/04 14:03
7F：→ dehydrogenas: 译後修饰的Cys是不是有被modify过 11/04 14:05
8F：推 czyangshoo: 请问有没有相关的paper可以参考呢？ 11/09 21:49