作者kerryai (米米)
看板Biotech
标题[求救] ELISA实验改参数
时间Fri Nov 20 02:46:38 2015
实验室在做non-fouling coating material 我们希望利用ELISA来比较不同程度的
fouling 以利於改进材料
实验流程大致如下:
将non-fouling material coat在基材表面 接着用human fibrinogen 1mg/ml
in PBS pH7.4 泡一个小时 拿出来之後反覆洗5次 在泡到HRP-anti fib 一小时
in PBS pH7.4 拿出来之後一样洗5次 接着再用OPD solution in
citrate phosphate buffer pH5 泡30min显色 接着再用H2SO4 solution quench
实验步骤本身没问题 问题出在non-fouling material coating 会脱离基材表面
我跟实验室同学讨论了结果 大致认为是 citate phosphate buffer pH5过酸
我们的材料耐不住(contol组好好的)
我的问题是有办法再不换HRP的前提下 改变OPD solution pH5的条件?
或是改变substrate? 感激不尽
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