作者aggaci (可找我下棋..)
看板Biotech
标题Re: [求救] SDS-PAGE sample太黏稠 很难沉到well底部
时间Mon Nov 23 22:53:10 2015
※ 引述《smallmin (小明)》之铭言：
: 我今天在跑SDS-PAGE
: sample是E. coli expression total protein
: 就是取1 ml菌液 5000 g 离心1分钟
: 去上清液 加入80 ul 2X sample buffer
: 100C 煮5分钟 煮完spin down
: 冷却後直接load到well 不分可不可溶
: 每个well load 10 ul
: 我有一部份sample可能因为菌量太浓
: sample非常浓稠 tip会被堵住 很难吸取
: 我用12,000 rpm 离心 1分钟
: 还是没有pellet沉淀
: 直接load到well 因为太黏稠 sample里面有气泡
: 气泡被包在sample里 很难除掉
: 导致sample会从well里浮上来 沉不下去
: 请问各位遇到这种状况怎麽处理?
: 如果我换4X或5X sample buffer会比较好吗?
: 谢谢
浓稠应该是因为genomic DNA 的关系
你可以取少一些，我觉得1mL可能太多了
还有以前我经验是煮完不需冷却直接load即可
这样比较不会浓稠
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单身不代表寂寞，寂寞是走在一个不爱你的人身边的时候。
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1F：→ smallmin: 谢谢:) 11/24 22:22