Cloning 相关问题 Vector为10K , RE 相距 9bp, 分别为 SNABI 及 NHEI (Sticky end and blunt end) NEB, smart buffer 取vector 1ug同时切两刀 o/n Insert 是chromosome PCR product 约 1.1K, 有major band , 而Primer有各预留 2bp 及 6bp. 跑完0.8%胶, 後进行clean up 利用NEB Quick ligation (Molar ratio: 1:7) 10 mins Transformation on ice 20 mins, heat shock 42度 45秒, on ice 5 mins Add S.O.C medium 500ul and incubation 1h 37度 取 200ul 涂盘 失败…已经试很多次 没有任何中继站 可以进行Check, vector 切完 也看不出来 Ligation完 10K->11K 也很难看得出来 不知道有没有高手使用过这两种RE????或是可以给点建议 发问时请注意，若是要问实验相关的问题，请将实验的步骤、所用的条件大致列出 以方便板友帮您追踪问题 若是求救事项涉及实验室智慧财产(例如细胞细菌植株、质体载体等）之分让， 请务必注明贵实验室愿意设立 正式合作或 签署材料分让协议(MTA)，否则版工将迳行删除 ----请将上列注意事项以 ctrl + k 删除後开始编辑文章---- --

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