作者jming (Jmin)
看板Biotech
标题[求救] REP-PCR
时间Sat Nov 28 14:33:43 2015
发问时请注意,若是要问实验相关的问题,请将实验的步骤、所用的条件大致列出
以方便板友帮您追踪问题
若是求救事项涉及实验室智慧财产(例如细胞细菌植株、质体载体等)之分让,
请务必注明贵实验室愿意设立 正式合作或 签署材料分让协议(MTA),否则版工将迳行删除
----请将上列注意事项以 ctrl + k 删除後开始编辑文章----
各位板友们好
最近小弟我再跑AB菌的rep-pcr,但不知道怎麽跑band都非常的淡,求解如何让band跑亮
步骤及条件如下:
REP-1 1ul
REP-2 1ul
PCR mix(5x) 8ul
无菌水 30ul
总量为 40ul
以200tip点菌
条件:
94度 5分钟
90度 30秒
32度 1分钟
65度 8分钟
65度 16分钟
跑36cycl
LE agarose 0.72 g(1.2%)+60 TBE
电泳: 20ul sample打入1.2% agarose gel以50V,跑3小时,照胶
谢谢
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc), 来自: 120.106.210.32
※ 文章网址: https://webptt.com/cn.aspx?n=bbs/Biotech/M.1448692426.A.CF2.html
1F:→ patricksky: 我可以问一下 你要跑亮的目的是? 让DATA好看还是其他? 11/28 20:56
2F:→ jming: 一方面是要好看,一方面要做亲缘分析,谢谢 11/28 20:59