作者autopass (how to give name)
看板Biotech
标题[方法] 冷冻切片IF要Heat-induced retrieval嘛?
时间Tue Jan 5 22:26:52 2016
我最近在染pERK in mouse brain tissue
(这只抗体,确定在paraffin section染IHC,可以染)
slides直接染,没讯号,
试了proteinase K, EDTA,retrieval都染不出来,
後来查到了一篇2015年的journal of neuroscience
它是用citrate buffer, pH 6.0, for 10 min
可是我一般做paraffin section的都会把buffer加热到滚
在放下去煮20分钟,
请问那cryosection要嘛?
看版上以前的讨论,过强的retrieval会造成false positive嘛?
谢谢回答...
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1F:→ osla30: 抗体比例浓一点试试呢? 01/06 08:11
2F:推 Realthugz: citrate 跟前面retrieval有啥不同? 01/06 12:43
3F:推 Realthugz: 烘片时间和fixation时间会不会影响这蛋白 01/06 12:44
4F:推 birdinucr: 我常染鼠脑冷冻切片的pERK,这抗体不用retrieval 01/06 20:07
5F:→ birdinucr: Slides直接染本来变因就大,用free floating吧 01/06 20:08
6F:→ autopass: 了解,感谢各位,我试试 01/06 22:30