作者ym951118 (Sakicho)
看板Biotech
标题[求救] DNA跑胶
时间Tue Feb 23 21:29:09 2016
最近抽dna跑pcr
产物跑胶结果都拖一长条
http://i.imgur.com/hkorbcc.jpg
同DNA
Load 4.6.8.10.11.12
27F 长度20bp Tm50.8 GC:47.5%
1492 R 长度22bp Tm52.0 GC41.5%
primer浓度 10uM
PCR条件
95度10分钟
95度1分钟, 梯度（54-60）1分钟, 72度1分钟 循环34次
72度10分钟延长
想问一下如果primer没夹到会这样吗？
还是其实是DNA的问题
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1F：→ a90648: 没P出东西 02/23 21:37
2F：→ xxtomnyxx: DNA 加太多吧.... 02/24 00:27
3F：→ supray: 同上 拖一条的是你input的gDNA下太多了 02/24 08:16
4F：→ ym951118: 我总体积20ul，DNA加1ul，所以我该降低dna 的量吗？ 02/24 08:57
5F：→ darkdoor: 你的Tm最高也只有52度,梯度最起码也要从50度开始拉吧 02/24 09:09
6F：→ Bows: dna 是要看重量加多少，体积会被你的浓度影响 02/24 10:12
7F：→ elite2: 做分生实验思维只停在体积，而没有浓度观念其实很危险阿 02/24 12:11
8F：→ supray: DNA过浓可以稀释後再取 02/24 17:43
9F：→ ym951118: 好，谢谢各位指教，dna浓度确实挺高的，我会再做调整 02/24 18:51