作者ad1980 (吱吱)
看板Biotech
标题[求救] WB 显影问题
时间Tue Mar 1 05:48:11 2016
大家好,有个关於 WB 显影的问题想请教。我们现在是用 Bio-Rad 的 Image Lab 看 WB
的 bands,但是有时候会出现下图这样不均匀的情况,试过用保鲜膜包住 membrane 让显
影剂均匀点,但是效果没很好,有时还是会出现这样不均匀的情况,不知道版上的各位有
没有这种困扰,都是怎麽解决呢?感谢。
https://imgur.com/WYeuQQ0.jpg
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc), 来自: 128.189.211.60
※ 文章网址: https://webptt.com/cn.aspx?n=bbs/Biotech/M.1456782495.A.43C.html
※ 编辑: ad1980 (128.189.211.60), 03/01/2016 06:02:40
1F:→ blence: 你认为哪些位置是不均匀? 03/01 09:30
2F:→ tynse71864: 感觉蛮均匀的阿? 03/01 21:24
4F:→ ad1980: 比较亮的地方 bands 会显得比较淡,这样不知道是因为量比 03/02 12:34
5F:→ ad1980: 较少,还是那块比较亮所以看起来比较少。@@ 03/02 12:34
6F:推 qiet: 这应该还好吧, 也许blocking时间久一点有办法更好 03/02 20:59
7F:→ ad1980: 可是刚好亮到要看的 bands 很麻烦,无法比较蛋白量。>"< 03/03 12:39
8F:→ ad1980: 我通常都 blocking 一个小时,应该够吧?@@ 03/03 12:39
9F:→ ad1980: 像这个上半完全看不清楚 QQ 03/03 12:57
11F:→ blence: 我觉得会这样还有sponge厚薄不均影响transfer时的效率 03/03 13:18
12F:推 as862437: 有可能有气泡吗? 03/03 14:59
13F:→ ad1980: Sponge 厚薄会影响啊?但我们实验室的是很大一块剪出来的 03/04 00:40
14F:→ ad1980: ,照理说都一样,有几次显影後染红看,transfer 看起来是 03/04 00:40
15F:→ ad1980: 没问题。 03/04 00:40
16F:→ ad1980: 转之前有用 glass pipettes 杆过应该是没泡泡 03/04 00:41