作者satan317 (贞夫)
看板Biotech
标题[求救] 关於细胞冷冻
时间Mon Apr 18 11:45:30 2016
想请问如果解冻养一代就再冷冻
会不会影响细胞内部的一些机制
导致降低重复实验的再现性
还是只是会影响存活率?
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1F:→ untilnow: 解冻一代再冷冻的目的是? 04/18 12:10
2F:推 greenmoon00: 建议不要,细胞解冻後其实蛮脆弱的,至少养个三代左 04/18 12:49
3F:→ greenmoon00: 右,确定细胞健康後再冻 04/18 12:49
4F:→ satan317: 因为老板要求实验用的细胞都是在同一代 我那时候冻大概 04/18 13:54
5F:→ satan317: 是算在我要做实验那代的前五代 我怕冻的那些细胞不太够 04/18 13:55
6F:→ satan317: 後续的实验 想说解冻一到二代再冷冻 之後解冻刚好养三代 04/18 13:56
7F:→ satan317: 再做实验 所以想问说如果这样冻的话是影响存活率还是内 04/18 13:57
8F:→ satan317: 部机转 如果只是影响存活率的话 对我没有差别这样 04/18 13:58
9F:→ blence: 细胞的机制这麽多,所谓的影响,也不一定会跟你的兴趣相关 04/18 14:03
10F:→ blence: 而且细胞是活是的存活状况,不也是细胞内的机制在调控吗? 04/18 14:04
11F:→ blence: 死 04/18 14:04
12F:→ blence: 如果你的细胞不是特别怪,你可以考虑以有限的冻管先做几次 04/18 14:09
13F:→ blence: 同时用後面一两代也留着试试,确认代数是否很关键 04/18 14:10
14F:→ blence: 以不同代的冻管养到同一代的细胞实验,跟同一批冻管前後代 04/18 14:13
15F:→ blence: 的结果还要差,如果老板很在意data的,就不会拘泥要同一代了 04/18 14:16
16F:→ satan317: 感谢你的建议 04/18 14:29
17F:→ Ice9: 如果对照因素和你老板做的那一代没什麽差异,基本上可以不用 04/18 17:20
18F:→ Ice9: 担心代数问题。如果代数结果有差异,那表示你们要控制代数问 04/18 17:22
19F:→ Ice9: 题,而且你们的实验可能要重新设计。 04/18 17:24
20F:推 joseph103331: 确认代数是否为关键+1 不然你就要考虑做cell bank 04/19 02:18
21F:→ joseph103331: 设定留存的细胞代数以及工作用的细胞代数, 才知道 04/19 02:20
22F:→ joseph103331: 用量, 也才好抓条件, 不过这个在细胞株应该没甚麽 04/19 02:20
23F:→ joseph103331: 必要才是....差个一两代不应该有差 04/19 02:21
24F:→ ararthur: 差一两代这个因子 跟细胞当下状态对实验结果的影响比起 04/29 13:50
25F:→ ararthur: 来 通常是小巫见大巫 不过或许你老板曾经有这方面的惨痛 04/29 13:50
26F:→ ararthur: 经验也说不定 如果细胞是具与differentiation potential 04/29 13:51
27F:→ ararthur: 也可能passage之间差异颇大 依旧要小心 04/29 13:51