作者elsavicky (Vicky)
看板Biotech
标题[求救] genotyping最近一直p不出来
时间Wed May 25 18:13:34 2016
最近genotyping某个gene一直p不出来，但一样的reagent去p另一个gene有出来。
已经trouble shooting过，包括换新的pcr grade water, reagent, primer等，依然有一样的情形发生，所以想请教板友，谢谢。
目前的结果
http://i.imgur.com/LccVwxM.jpg
以前正常的结果
http://i.imgur.com/BVfkrrR.jpg
以前和现在的pcr条件都一样，没有改变
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1F：→ sunorange: 把你的DNA稀释就会出来了 05/25 22:09
2F：→ e104582001: DNA下太多了 05/25 22:40
3F：→ elsavicky: 有稀释过DNA,也有放positive control(以前Ｐ得出来） 05/25 23:12
4F：→ elsavicky: 在smear的部位隐约有清楚的major band... 05/25 23:14
5F：→ elsavicky: 忘了说...连negative control都是一样smear状 05/25 23:39
6F：推 patricksky: primer污染? 05/26 10:09
7F：→ patricksky: primer换新的是只重订一只 还是只是重新稀释? 05/26 10:09
8F：→ elsavicky: 全部重新订过，用新买的pcs-grade water稀释（在hood） 05/26 12:12
9F：→ elsavicky: pcr grade water 05/26 12:13
10F：推 patricksky: 如果全部材料都换过 就有可能是环境或是人为操作问题 05/26 13:29
11F：→ patricksky: 比较常见就是pipetmen的头污染 05/26 13:30
12F：→ patricksky: 能拆就拆 然後头部分泡泡酒精 接着丢去灭菌 05/26 13:32
13F：→ patricksky: 如果不能拆或怕的话 做简单灭菌也可以 05/26 13:32
14F：→ patricksky: 另外要注意的是之後pipet清理後记得做校正 05/26 13:33
15F：→ elsavicky: 谢谢你，我们也怀疑是pipette污染，今天去hood操作，已 05/26 14:38
16F：→ elsavicky: 经p出来了！ 05/26 14:38