作者cyc5566 (西哇西)
看板Biotech
标题[求救] 老化marker beta galactosidase染色
时间Fri Jul 1 16:17:08 2016
各位版友好,
我的研究题目与老化相关,所以需要建立体外cell line aging model.
最近卡在 beta-gal 的染色实验需要各位给我一点意见.
我使用Hydroxyurea还有Etoposide诱导cell line老化,
这两种药物都有文献支持可以在cell line上成功诱导老化并有beta-gal染色positive.
这是我希望得到的结果(from google)
http://imgur.com/6eWRR0e
可是我染出来的结果却不如预期,Control组与药物组的结果如下图:
Control
http://imgur.com/HrYXl3i
Hydroxyurea 600microM 14天
http://imgur.com/fKmjGPt
Etoposide 10microgram/ml 14天
http://imgur.com/QsNOo7F
最近一直盯这看,我都觉得好像有一点点绿色了(自我催眠)....
另外,染色的技术已经用老化的primary cell做过测试,kit也没问题,都是positive.
可以麻烦各位给我一点意见吗?我已经不知道怎麽调整比较好了,谢谢!
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1F：推 mandible: 其实慢明显了，只是你细胞养的太满了吧 07/02 09:10
2F：推 darrenyo: 怎麽倍率不同@@？ 07/02 15:26
3F：→ cyc5566: 好的我会减少细胞数，另外倍率是一样的哦，老化的细胞核 07/02 23:01
4F：→ cyc5566: 会变大，整个细胞膜摊平 07/02 23:01
5F：→ aaa111bb2: 1. 细胞数减少。2. PBS Wash x2。 3. 显微镜是黄光 减 07/07 02:46
6F：→ aaa111bb2: 光片拿掉。 可以改善很多 07/07 02:46
7F：→ tchan: 反而觉得是control染太深，也许减少染色时间看看... 07/09 21:46
8F：→ tchan: 但是你实验组的细胞明显比较不健康，可能需要确定是否有死 07/09 21:47
9F：→ tchan: 你实验是诱发细胞老化而非细胞死亡，那些细胞感觉快死了 07/09 21:48
10F：推 cjsntu: 好像本来就不太好染 03/27 23:27
11F：→ cjsntu: 另外是跟盘子的材质有关，印象中要避开PE还是PP的样子 03/27 23:27