作者reiosea (reiosea)
看板Biotech
标题[求救] 羟脯胺酸浓度测定
时间Wed Aug 17 04:56:22 2016
大家好
小弟最近要测定胶原蛋白的浓度，胶原来源为sigma购买之胶原蛋白溶液。
所使用的方式为sigma所购买的hydroxyproline assay。
其中一个步骤是先将胶原蛋白加上12N的HCl於120oC下酸化三小时，
再来置於60oC让HCl挥发。
But，我使用kit规定的PTFE-lined cap以及瓶子，於120oC下酸化三小时还是会挥发。
想请教有做过的先进这样的情况是正常的吗？由於他的第二步骤是在60oC让HCl挥发，
所以我硬做了一次，不管他在120oC挥发了多少，经过60oC处理後回溶，发现几乎测不到
hydroxyproline的存在。温度控制皆在烘箱下进行
恳请有做过的大大给予指点ＱＱ
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1F：推 e53953811: 鲁妹最近也失败，放在烘箱但是三小时之後盖子里面整 08/18 15:33
2F：→ e53953811: 个烂掉，已询问到做过此实验的善心人士，问完在告诉 08/18 15:33
3F：→ e53953811: 你QQ 08/18 15:33
4F：→ reiosea: 感谢正妹！！我最近有成功，盖子不要盖太紧。 08/19 07:58
5F：→ reiosea: 感觉是因为旋太紧，瓶子遇热膨胀才把PTFE挤破。 08/19 07:59
6F：→ reiosea: 若您有问到什麽秘诀再请您跟我说ＱＱ 08/19 08:00
7F：推 e53953811: 是因为悬太紧吗？可是他告诉我要旋紧欸！所以你是没 08/19 20:14
8F：→ e53953811: 旋紧成功了吗？ 08/19 20:14
9F：→ reiosea: 我是旋转至紧後再用力旋一下，之前都是死命旋紧。 08/20 03:34
10F：推 e53953811: WTF 我狂煮乾欸！盖紧跟松结果都乾掉… 08/26 13:12
11F：→ reiosea: 我现在做都不会蒸发了耶，请问你是用PTFE-lined cap吗？ 08/27 01:26