作者reiosea (reiosea)
看板Biotech
标题[求救] 羟脯胺酸浓度测定
时间Wed Aug 17 04:56:22 2016
大家好
小弟最近要测定胶原蛋白的浓度,胶原来源为sigma购买之胶原蛋白溶液。
所使用的方式为sigma所购买的hydroxyproline assay。
其中一个步骤是先将胶原蛋白加上12N的HCl於120oC下酸化三小时,
再来置於60oC让HCl挥发。
But,我使用kit规定的PTFE-lined cap以及瓶子,於120oC下酸化三小时还是会挥发。
想请教有做过的先进这样的情况是正常的吗?由於他的第二步骤是在60oC让HCl挥发,
所以我硬做了一次,不管他在120oC挥发了多少,经过60oC处理後回溶,发现几乎测不到
hydroxyproline的存在。温度控制皆在烘箱下进行
恳请有做过的大大给予指点QQ
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1F:推 e53953811: 鲁妹最近也失败,放在烘箱但是三小时之後盖子里面整 08/18 15:33
2F:→ e53953811: 个烂掉,已询问到做过此实验的善心人士,问完在告诉 08/18 15:33
3F:→ e53953811: 你QQ 08/18 15:33
4F:→ reiosea: 感谢正妹!!我最近有成功,盖子不要盖太紧。 08/19 07:58
5F:→ reiosea: 感觉是因为旋太紧,瓶子遇热膨胀才把PTFE挤破。 08/19 07:59
6F:→ reiosea: 若您有问到什麽秘诀再请您跟我说QQ 08/19 08:00
7F:推 e53953811: 是因为悬太紧吗?可是他告诉我要旋紧欸!所以你是没 08/19 20:14
8F:→ e53953811: 旋紧成功了吗? 08/19 20:14
9F:→ reiosea: 我是旋转至紧後再用力旋一下,之前都是死命旋紧。 08/20 03:34
10F:推 e53953811: WTF 我狂煮乾欸!盖紧跟松结果都乾掉… 08/26 13:12
11F:→ reiosea: 我现在做都不会蒸发了耶,请问你是用PTFE-lined cap吗? 08/27 01:26