作者LIAR (玻璃做的大叔)
看板Biotech
标题[求救] 请问如何动态追踪细胞是否复制？
时间Sat Aug 27 13:59:55 2016
我取了脑组织做培养，primary不会太纯，只少astrocyte一定有，
平常都有ARA-C抑制生长，如果没加的话，过一星期就会看到满满的非神经细胞。
现在我观察到细胞成团，而且会越来越大，所以有两种可能
1.replication，可能Cytarabine没能完全抑制
2.migration，就只是旁间零星细胞的聚集
如果用brdU固定染色就只有一个时间点，我想用timelapse追踪确认
请问哪些办法，可以持续追踪一个增大的细胞团是因为复制或别的细胞移动聚集？
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"Don't hate the player. Hate the game."
当看到哪个名人赚了大钱，领到高额补助或利息，不要去指责他，
而是要指责那个制度、创造那个制度的人，以及默许那个制度的人。
不然你认为一个人不领18%或是一个人不炒房价，就会改变整体环境吗？
还不如改变【修改制度的人】，才能从根源改变一切。
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1F：推 jabari: 去买一台Lonza的Cytosmart 就可以啦... $$$$ 08/27 14:33
2F：→ LIAR: 唉！有钱大家都可以发seience了，说点没钱的方式吧XD 08/27 14:48
3F：推 captdavince: 你可以用染的，cell tracker, 染了再养，有很多种 08/27 14:51
4F：→ captdavince: qdot的比较贵，但是如果是replicate的话萤光强度减半 08/27 14:52
5F：→ captdavince: 的趋势好像比染料的好. 08/27 14:52
6F：推 payton103075: 若migration的细胞有特定maker 可以染活体萤光看不 08/27 15:31
7F：→ payton103075: 时间 看是否有移动以及细胞团是否有萤光出现? 08/27 15:31
8F：推 goodday06: timelapse microscopy 直接观察? 08/27 16:57
9F：→ LIAR: 我们有timelapse，但悬浮球的xyz很难定位，又会旋转... 08/27 21:30
10F：→ Ianthegood: 对啊pulse chase的染色 hoechst染核就可以了吧 08/27 22:39
11F：→ LIAR: 不过随时间不分裂hoechst也会弱掉吧？我应该如何比？ 08/28 00:21
12F：→ LIAR: 而且显微镜萤光不是最好别定量？ 08/28 00:21
13F：推 Ianthegood: 上flow? 再用fixed又染过的细胞当control 08/28 03:12
14F：→ goodday06: sorter 分离不同群细胞--> 萤光dye标定特定细胞 08/28 18:28
15F：→ goodday06: -->再混合回去养-->追踪萤光分布 08/28 18:28
16F：推 h3250sam: 染CFSE这种CellTrace dye，分成实验组和抑制分裂的 08/29 00:13
17F：→ h3250sam: control组，收细胞上flow看萤光强度，没分裂的话萤光强 08/29 00:14
18F：→ h3250sam: 度应该会和control一样，有分裂就会呈现萤光衰减分布 08/29 00:15
19F：推 h3250sam: 还可以配合特定marker进行复数染色，区分出不同细胞群 08/29 00:19