作者darrenyo (球)
看板Biotech
标题[求救] Western抗体reuse保存
时间Wed Aug 31 18:00:46 2016
如标题，想请问大家到底抗体reuse的保存方式怎麽样最好呢？
上网查资料发现大家都是建议加sodium azide保存在四度
不过都是写可以reuse三到五次
我们实验室则是把抗体放-20 reuse，当然Freeze thaw cycle应该很伤
可是也常常可以reuse超过五次(internal control 甚至用了20次左右)
想请问实际使用上加Sodium azide保存四度到底可以reuse多少次或是放多久?
究竟怎麽样保存最好呢? 感谢大家!
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1F：→ Ice9: 看抗体效价和milk/BSA新鲜度。3-5次是一般（-20度）。 08/31 19:40
2F：→ blence: 没用过sodium azide,至於-20,可reuse效果跟你一样 08/31 19:53
3F：→ heydream: 想问问抗体是指milk泡制完，冰在-20，也只reuse4-5次吗 08/31 22:12
4F：→ heydream: ？ 08/31 22:12
5F：推 tz2733: 我是配在BSA里的加sodium azide後 冰4度 没长沉淀物就一 08/31 22:23
6F：→ tz2733: 直用...或Hy出来太弱就加一点新抗体跟BSA buffer(有冰半年 08/31 22:23
7F：→ tz2733: 一年还在用的...哈哈) 配在牛奶里的则可能1-2个月就分层 08/31 22:23
8F：→ tz2733: 变色长东西 就丢了 08/31 22:23
9F：推 ktirene: 同楼上用法，冰一年也没事～ 09/01 00:56
10F：→ darrenyo: 所以中间一直有reuse用一年没问题这样？ 09/01 01:06
11F：推 chousai: 想请问加sodium azide的目的是什麽？一定需要加吗？据 09/01 02:23
12F：→ chousai: 我所知我们实验室配一抗不会加耶！但都会reuse直到照不 09/01 02:23
13F：→ chousai: 太出来 09/01 02:23
14F：→ ghjkl5566: NaN3很强的抗菌剂 但也很毒 若加了记得一定要戴手套 09/01 02:54
15F：推 boblu: case by case 啦。 BSA + NaN3 强的抗体可以一管用到毕业 09/01 04:30
16F：推 formoxa: 我认为主要是看抗体，有reuse10次就挂掉的也有1年OK的 09/01 16:07
17F：→ darrenyo: 想请问楼上是冰-20 还是4度呢? 09/01 18:08
18F：推 formoxa: 我都冰-20，4度坏很快 09/06 15:10
19F：→ formoxa: 还有配抗体就不要用牛奶了，用BSA比较稳定延後腐坏时间 09/06 15:16
20F：推 tynse71864: F大是用 5%Bsa吗 09/06 16:34
21F：→ blence: 冻-20都可以用半年了,改用BSA的诱因是什麽？ 09/06 16:58
22F：→ blence: 而且配抗体选用BSA或牛奶,不是以哪一种适合reuse在考量 09/06 16:58
23F：→ blence: 主要的考量因素还是WB结果,呈色不好看,能保存久放也没用 09/06 17:00
24F：→ formoxa: 当然是以结果考量，如果经费许可原PO又想reuse为什麽 09/07 14:04
25F：→ formoxa: 不优先选等级比较高的？ 09/07 14:05
26F：推 formoxa: 是，我是用5% BSA 09/07 14:14
27F：→ formoxa: 但是我没加NaN3，这你可以自行决定 09/07 14:17
28F：→ blence: 会用牛奶就是多数抗体在5％BSA的效果都不好,这就是限制了 09/07 16:20
29F：→ blence: 跟等级无关,你应该先厘清有谁愿意改变data结果,只为reuse 09/07 16:29
30F：→ blence: 而且如果BSA稀释的data好看,早就冻在BSA reuse,没换的必要 09/07 16:32
31F：→ formoxa: 你讲反了;另外原PO也只是在问reuse 09/07 21:02
32F：→ Eyer: 常保低温，在4度hy 09/18 19:08
33F：→ Eyer: 不过价力低的抗体可能难在4度hy 09/18 19:10