作者ivan1209 (根本科科)
看板Biotech
标题[求救] HPLC tailing的问题
时间Thu Oct 6 04:55:59 2016
大家好，目前小弟在peptides合成的公司上班
今天遇到UPLC在主峰後面有类似tailing(or back shoulder)的问题，当然也有可能是back impurities
我之前大学专题跟研究所都是以研究有机合成为主
HPLC对我来说是完全新的东西目前慢慢在学
先假设这个情况是tailing来说
我的想法是利用ammonium acetate去过一下柱子之後在用95%水洗一下柱子之後再去跑samples
会这样想是因为我猜NH4+也许可以binding在Si-O-上可以减少tailing的问题
不晓得这样的观念是不是有错误??
主管他们是决定用pH小於12浓度的的NaOH是洗柱子
结果确实是解决tailing的问题
想请教一下用硷去洗柱子这样是甚麽想法为什麽可以解决tailing的问题?
(我们公司很常利用1%TFA and 1g/L NaOH去洗prep HPLC)
非常感谢指教
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc), 来自: 174.63.200.228
※ 文章网址: https://webptt.com/cn.aspx?n=bbs/Biotech/M.1475700963.A.E08.html
※ 编辑: ivan1209 (174.63.200.228), 10/06/2016 05:01:00
1F：推 Ianthegood: 主要不是bind到column而是留在column上的渣渣 OH-洗渣 10/07 16:00
那请问为什麽那些脏东西会造成拖尾呢? 如果很多东西应该卡住应该会阻塞变成fronting?
※ 编辑: ivan1209 (174.63.200.228), 10/07/2016 20:04:29
2F：推 Ianthegood: 不是阻塞而是你的东西会被retain在渣渣上吧 10/08 19:19
3F：→ ivan1209: 了解! 谢谢你 10/08 20:53