作者xxtomnyxx (翼天)
看板Biotech
标题Re: [讨论] 3c 4c 5c hi-c技术
时间Wed Oct 26 22:56:57 2016
有一篇《Trends in Genetics》的 Feature Review 对这系列的技术有不错的说明,
标题是:
Unraveling the 3D genome: genomics tools for multiscale exploration
http://www.cell.com/trends/genetics/fulltext/S0168-9525(15)00063-3
你如果能阅览全文的话十分建议去看看,
里面有各种 C 的简单 protocol、所需细胞量、解析度以及如何得到 data。
※ 引述《tony51501 (x-ray)》之铭言:
: 小弟在网路上爬文,大约了解这些相关的技术
: 但是如果再选用方法上面,会如何选用?
除了 3C、4C、5C、Hi-C 外,
还有其他衍生的技术,如:ChIA-PET,
这些技术的用法也都有所不同,
3C 是 one to many,
你有一个目标 locus,
你想验证这个目标 locus 会和哪些你选定的 loci 有 interaction,
这种情况下才适合用 3C。
4C 是 one to all,
用一段选定的 locus 去找出所有和这段 locus 有 interaction 的对象,
如果你想找出会和选定的单一 locus 有 interaction 的 loci,
4C 是不错的选择。
5C 是 many to many,
用在你只想看你选定的一群 loci 之间彼此 interaction 的状况。
Hi-C 是 all to all,
就是去看整个细胞核中所有 loci 彼此之间的 interaction。
顺便提一下 ChIA-PET,
这个技术是指定一个蛋白质(通常是 transcriptional factor),
找出由这个蛋白质所产生的所有 chromosome interaction。
: 3c是最早出来的技术,但感觉好像还是很多人再用3c它有什麽在技术上的优点或缺点吗?
优点就是因为不用做高通量定序,
所以相对其他 C 十分的便宜,
而且只需要用 qPCR 就能快速得到结果,
所以得到 data 的速度最快,
灵敏度也很高。
缺点是只能 one to many,
只有在目标 locus 和对象都已知的情形下能用。
(如 β-globin 基因和它的 locus control region)
: 那hi-c 是利用high throughput sequencing 多对多方式来找dna fragment序列,那它要
: 拿什麽sample来做?网路上的图好像是拿4c 5c 的sample,但是4c 5c的sample不是很少
: 吗?
4C、5C、Hi-C 的 sample 多寡取决於你起始的细胞量,
只要一开始的细胞量够多,
就能得到不少的 library。
然後基本上,
除了 3C 外,
这是一个非常烧钱的实验!
而且除了 3C 外都会动用的高通量定序,
资料分析也是个不小的问题......
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc), 来自: 120.126.39.94
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※ 编辑: xxtomnyxx (120.126.39.94), 10/26/2016 23:06:50
1F:推 roy047: 考试都有考到 不过考完就忘了 推XD 10/26 23:38
2F:推 tony51501: 呜呜 感动推 谢谢 10/27 00:00
3F:推 aceliang: 推 10/27 11:57