作者LIAR (玻璃做的大叔)
看板Biotech
标题[求救] HCl泡过後DAPI会没法染
时间Sun Oct 30 18:51:58 2016
我现在在做BrdU的蜡切，protocol中需要HCl去DNA denature，
根据ABCAM，我用2M HCl泡1小时，对照组用PBS。
曝光，没有泡HCl的强度爆表(4095以上)，泡过得不到200。
这是泡过HCl
http://tinyurl.com/hd2usdk
http://tinyurl.com/jt62prf
没泡HCl
http://tinyurl.com/zubm3of
http://tinyurl.com/zvl3lvu
看来HCl也会破坏DAPI的效果，请问各位染过BrdU蜡切片的，denature条件
都抓多少呢？
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"Don't hate the player. Hate the game."
当看到哪个名人赚了大钱，领到高额补助或利息，不要去指责他，
而是要指责那个制度、创造那个制度的人，以及默许那个制度的人。
不然你认为一个人不领18%或是一个人不炒房价，就会改变整体环境吗？
还不如改变【修改制度的人】，才能从根源改变一切。
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1F：→ e104582001: 我怎麽记得DAPI是要卡在dsDNA中 10/30 23:24
2F：→ LIAR: 可是一般IF也适用HCl去处理，两个可同时染 10/30 23:43
3F：→ e104582001: 我做过的IF从来没有用过HCl... 10/31 00:52
4F：推 cyc5566: IF为什麽要用HCl? 10/31 12:00
5F：推 tynse71864: IF没有吧！？ 10/31 21:08
6F：→ williamyang: 若是用EdU做click reaction就不需要HCl 11/01 04:04
7F：→ soom: 试试加0.1 M sodium borate pH 8.5, 室温30分 去中和HCl 11/02 04:56
8F：→ soom: 另外，BrdU染色需要denature DNA所以需要HCl 11/02 04:58
9F：→ LIAR: 不能只有PBS去洗HCl吗？ABcam也说sodium borate是option， 11/06 19:58
10F：→ LIAR: 我以为不重要。 11/06 19:58