作者shiaoyeh ((放空))
看板Biotech
标题[求救] 冷冻切片在sucrose步骤发生的问题
时间Wed Nov 16 17:43:10 2016
各位前辈好，
最近在做spinalcord的冷冻包埋
使用4%PFA perfusion
取下spine後 再用4%PFA固定一晚
再用PBS wash 浸泡一晚
接着10%-20%-30% sucrose 各脱水一晚
然後遇到一个问题是，
在当我换到sucrose後，我的组织不会沉下去
我看protocol 都说要沉底部後再换下一个浓度继续脱水
请问一下，这问题可能是在哪里?
是我的组织没有取好吗? 还是有气泡在里面之类的?
麻烦有经验的前辈指点我一下><
千万个感谢
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1F：推 heidy0419: sucrose泡多久?我曾经泡到第三天才沉下去 11/17 13:41
2F：推 susu8n0: sucrose : sample的体积比要够大，至少20:1以上 11/21 15:35