作者markonly (badguy)
看板Biotech
标题[求救] lentivirus concentration
时间Fri Nov 25 13:36:30 2016
各位好~小弟我因为lentivirus的titer不够所以做了concentration，
但是re-titration後，titer好像没有高多少，应该是我concentration失败了，
我想请问是否有人做过virus的concentration?
可否给小弟一些建议?
以下是我concentration的步骤
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材料: Spin-x UF 20 Spin tube
1.用无菌水prerinsing 3次。
2.将病毒在室温下解冻。
3.将病毒取到 tube 里。
4.用 3000g，4度，离心，每3到5分钟检查一次。
5.当病毒液到我要的量的时候停止离心。
6.使用0.2 filter 过滤病毒。
7.存放在 1.5ml 冷冻管，并放在4度冰箱，两天後开始进行titration。
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如果我步骤上有问题，还请各位不要客气，用力鞭下去就对了!
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1F：推 shelix: 先浓缩再冷冻? 11/25 14:40
2F：→ soom: 4度C放两天好像久了点 11/25 14:42
3F：推 poison7202: .2 um filter? 11/25 20:49
4F：推 MDCCLXXVI: 浓缩管 MWCO多少呢 11/26 21:56
5F：推 wanderchang: lenti比200nm小吧 11/28 12:25
6F：→ silverberry: 四度放太久了，病毒离开活体死得快~ 11/28 23:27
7F：→ silverberry: 哪个系列的载体包的? 比例如何? 11/28 23:28
8F：→ silverberry: .22 filter 是 PVDF or PES or? 11/28 23:29
9F：推 freedomk0115: 用简单的glucose gradium搭配高速离心就可以解决了 11/29 16:25
10F：→ homeshawn: 个人好奇这样加速减速对病毒的套膜会不会有损害@__@ 11/29 23:10
11F：推 silverberry: 之前用过超高速离心收，PBS均匀悬浮以後直接冻-80 12/01 00:06
12F：→ silverberry: 後来感染起来也没什麽问题 12/01 00:07