作者ohyeh1021 (史前巨熊)
看板Biotech
标题[求救] partially assembled IgG纯化
时间Wed Dec 14 11:49:42 2016
各位先进好
最近在做antibody(hybridoma)的纯化
发现在protein A的elution中有partially assembled IgG(2H1L,1H1L)
应该要再做什麽column的纯化
(IEX, HIC or SEC)
大概流程:
1.收集上清液(serum-free,离心去细胞)
2.protein A purification
(binding buffer:20mM phosphate, 150mM NaCl, pH=7.0)
(Elution buffer:100mM Glycine-HCl, pH=3.0)
3.buffer exchange to PBS by Amicon
4.PAGE--->发现partially assembled IgG
感激不尽!!
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1F：推 huangsw: 总体积大吗? 不大的话跑个SEC应该可以很纯 12/15 12:57