作者knowledge265 (lonelyvenice)
看板Biotech
标题[求救] compound分装後失效了
时间Wed Dec 21 12:21:57 2016
发问时请注意,若是要问实验相关的问题,请将实验的步骤、所用的条件大致列出
以方便板友帮您追踪问题
若是求救事项涉及实验室智慧财产(例如细胞细菌植株、质体载体等)之分让,
请务必注明贵实验室愿意设立 正式合作或 签署材料分让协议(MTA),否则版工将迳行删除
----请将上列注意事项以 ctrl + k 删除後开始编辑文章----
小弟我目前是在做加药实验,以compound treatment後观察细胞凋亡
目前手上有2只compound都是溶於DMSO中,2只compound是完全不同萃取物的
配置成10mM的stock後保存
一开始用MTT筛的时候IC50很确定大概在0.5uM,由於考量到多次解冻问题,於是将stock
分成数小管分装好,但是在我分装完後再进行MTT後发现0.5uM完全没效,compound存在
-20度冷冻且有避光,不知道有没有人有办法解决这种问题
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1F:推 openlee: 卡 12/21 12:24
2F:推 cellpharmacy: 有多的powder重新配制吗? 12/21 15:35
3F:→ cellpharmacy: 说不定药本身溶於DMSO是不稳定的 12/21 15:37
4F:→ knowledge265: 没有多的Powder喔 但是根据以前的文献都是用DMSO 12/21 16:13
5F:→ vetvet: 由棕色玻璃瓶换到1.5ml塑胶tube? 12/21 18:29
6F:推 lunarblue: 基本上溶液态的试样可能因为小尺度的aggregation或是与 12/21 19:31
7F:→ lunarblue: 溶剂作用而使其有效浓度降低,特别的是DMSO也具有一定 12/21 19:32
8F:→ lunarblue: 化学活性,因此即使分管保存,仍会有坏掉的可能。此外 12/21 19:33
9F:→ lunarblue: 溶剂中所含有的氧气亦有可能造成氧化性的化学转换 12/21 19:33
10F:→ lunarblue: 当然这种现象不是一定会发生,毕竟DMSO的确是个很好使 12/21 19:34
11F:→ lunarblue: 用的溶剂。解决方法其一为上面推文所述,重新以powder 12/21 19:35
12F:→ lunarblue: 配置stock soln,其二为若化合物珍贵不易取得,则可建 12/21 19:35
13F:→ lunarblue: 议就现有溶液中重新纯化取得纯化合物。 12/21 19:36
14F:→ lunarblue: 若发现此现象,尔後的实验规划需注意调整实验日程,尽 12/21 19:38
15F:→ lunarblue: 量新鲜配置试样 12/21 19:38
16F:→ lunarblue: 东西不是冰起来就不会坏的~ 12/21 19:38