作者LIAR (玻璃做的大叔)
看板Biotech
标题[求救] 请问如何分析ECM的成分？
时间Sun Feb 26 13:07:17 2017
请问如果想知道细胞分泌且吸附在材料的ECM种类，应该要如何处理？
我有种fibroblast或endothelial cell，虽然试过triton+氨水来decellularized，
但後续的进行就很不顺利。如果用萤光染，就是一整片讯号，无法确定
是不是背景讯号，也没有型态可言，而且不同材料，原本背景也不同。
而我用RIPA像是跑western去收下来，定量几乎定不到，就算种再多盘，但
lysis buffer也会等比例增加，浓度上不去，目前染色也染不到，
想送mass人家至少希望有band位置才能比database。
请问ECM protein的分析，我应该要怎麽处理比较好？
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"Don't hate the player. Hate the game."
当看到哪个名人赚了大钱，领到高额补助或利息，不要去指责他，
而是要指责那个制度、创造那个制度的人，以及默许那个制度的人。
不然你认为一个人不领18%或是一个人不炒房价，就会改变整体环境吗？
还不如改变【修改制度的人】，才能从根源改变一切。
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1F：推 tz2733: 我作WB收到浓度太低的sample 会把sample通过浓缩管提高浓 02/26 15:08
2F：→ tz2733: 度 给你参考 02/26 15:08
3F：→ LIAR: 浓缩管要怎麽选？请问哪家有卖？ 02/26 17:10
4F：→ LIAR: 会不会反而卡在管上的反而多？ 02/26 17:10
5F：→ Ianthegood: google amicon 02/26 17:33
6F：→ Ianthegood: mass不能整个sample送吗 02/26 17:34
7F：推 stampede1215: 浓缩管可以选 Millipore or Sartorius 的 02/26 17:39
8F：推 stampede1215: 至於会不会吸附在膜上就要去要试用来试试了 02/26 17:40
9F：推 tz2733: 浓缩管有依照目标蛋白的size(KDa)分 所以可能要先对你目 02/26 17:48
10F：→ tz2733: 标蛋白size作了解 才不会收错 至於会不会卡膜上 这我也不 02/26 17:48
11F：→ tz2733: 清楚ㄟ...但好像有出很小体积的款式 降要卡住也卡少一点>< 02/26 17:48
12F：→ tz2733: 找楼上提的那几家的业务来问问吧~~ 02/26 17:48
13F：→ LIAR: 请问ECM....选200kD以上合理吗？ 02/26 18:26
14F：→ LIAR: 这边贵仪有说不能整管送，如果我会操作或是我可以操作也许 02/26 18:27
15F：→ LIAR: 就不会这麽烧脑筋了 02/26 18:27
16F：推 abcam: 小量浓缩 有pall/millpore 02/26 21:19
17F：推 tynse71864: 比较推 M牌 02/27 09:43
18F：推 kaoru7568: pall有eppendorf大小的浓缩管，大一点就15mL tube 03/02 20:48