作者liberty5556 (赫拉克罗斯)
看板Biotech
标题[闲聊] 询问大肠杆菌BL21(DE3)表达重组蛋白
时间Wed Apr 19 17:05:46 2017
http://i.imgur.com/4PlsdE0.jpg
问题是这样的蛋白预计分子量为38kDa.(不含6x his )
但实际跑SDS-PAGE
目标片段跟marker比对。却是介於40-55kDa..
请问该如何解呢
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1F：推 satantaco: 合理 请想像1.胶体的3D立体结构 里面有空隙 让蛋白质 04/19 17:42
2F：→ satantaco: 在里面跑 一样分子大小蛋白质 折叠的比较密的 跑比较快 04/19 17:43
3F：→ satantaco: 比较松散的 跑比较慢2.分子量大小一样 电性可能不同 04/19 17:43
4F：→ satantaco: 电泳跑快跑慢 很难说3.分子量标准品是某个蛋白用作比照 04/19 17:44
5F：→ satantaco: 所以某个片段大小 是相对位置 不是绝对位置 只能说应 04/19 17:45
6F：→ satantaco: 该在差不多位置附近 而不是绝对位置4.6XHIS也是有大小 04/19 17:46
7F：→ liberty5556: 了解！感谢你 04/19 18:16
8F：推 Ianthegood: 带正电比较多的蛋白会跑得比较慢 压个western或打个MS 04/19 19:20
9F：→ Ianthegood: 确认? 04/19 19:20
10F：推 asd03082002: 或者确认一下有没有看对marker，遇过有人不管用什麽b 04/28 15:50
11F：→ asd03082002: uffer跑胶都看同一组，有时候就是band上面或下面的差 04/28 15:50
12F：→ asd03082002: 别 04/28 15:50