作者tobbaco (tobbaco)
看板Biotech
标题[讨论] small RNA enrichment的萃取问题
时间Thu Apr 27 13:09:37 2017
各位前辈好
想请教各位一个问题
市面上卖的核酸萃取套组抽取miRNA的部分
大多都是利用液相萃取後的上层液放入spin column去binding
在做small RNA enrichment 的程序时
先加入少量的酒精binding分离 large RNA
取滤出液後加入量较大的酒精binding上 spin column後wash 再elution
想问分离large RNA 时 为什麽 large RNA会被binding住，而小的不会呢?
我这里想到就是利用酒精对片段大小RNA的沉淀效率不同，被过滤掉
或是大小片段的RNA对silica surface 的 affinity不一样
但後者迟迟想不出合理解释呢
想问其中的真正机制是如何? 查过protocol都只说large RNA会被" immobilize"
在spin column 上 相关的机制我还是不太清楚
谢谢各位指教
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