作者tina62119 (wewennn)
看板Biotech
标题[求救] coomassie blue band 反白
时间Wed May 3 10:00:13 2017
不好意思想请问一下各位前辈
我跑了8%的SDS胶(没有加gelatin)
(protein的量是50ug/20ul)
因为不太确定protein位置
所以想染coomassie blue看看
(reused 一次的染剂 室温摇晃染30分钟 用ddH2O 室温摇晃退染一天)
结果染出来的band不是蓝色
而是呈现和染gelatin 时一样的反白状
因为是第一次出现这种状况
爬文也只有看到有人问过Western 的band反白
估狗也没有找到答案
想请问一下有人知道为何会呈现反白吗?
或有人也有类似经验吗?该如何解决呢?
谢谢
http://i.imgur.com/oMSxSNG.jpg
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1F:推 tynse71864: 我记得退染是用50%MeOH+10%HOAc吧? 05/03 13:07
2F:→ tina62119: 因为之前也是用水退 不过是第一次这样 05/03 15:41
3F:→ tina62119: 谢谢建议我下次试试!! 05/03 15:41
4F:→ Ianthegood: 我也记得是醋酸 不过这跟你的染剂配方也有关系 请goog 05/03 16:28
5F:→ Ianthegood: le自己的染剂配方 05/03 16:28
6F:→ blence: 有些公司会卖G250配好的整瓶,就有建议用水退染即可 05/03 17:04
7F:推 icheee: 确实是有那种商品 simply blue 是用水退染即可 05/03 18:18
8F:→ Ianthegood: 我有疑似是simply blue的recipe 里面是etoh跟g250 不 05/03 21:20
9F:→ Ianthegood: 过simply blue不会把背景染成那样 05/03 21:20