作者dasiy3112001 (~让我考上吧~)
看板Biotech
标题[求救] PCR marker没跑出来
时间Fri Aug 4 20:23:10 2017
如题，我是用波牌 １００bp DNA marker跟６X loading buffer，比例sample５：buffer
１，但照胶时marker没出来就更别说有其他band了，UV照胶也都有设定，而且已经试两次
都ㄧ样，这是发生什麽事嘛？
再者pcr机器会有可能影响批不出东西的原因吗？
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1F：→ blence: PCR机器当然不会影响UV照胶时marker没出来 08/04 21:42
2F：→ dasiy3112001: 我是想问机器是否会影响无产物的情况呢？不好意思没 08/04 21:46
3F：→ dasiy3112001: 讲仔细。 08/04 21:46
4F：推 asdfgpooh: 配胶有加dye吗？ 08/04 22:14
5F：推 e104582001: 一班来说没有MARKER99%是胶没做好，EtBr OR DNA染剂 08/04 22:16
6F：→ e104582001: 有加? 08/04 22:17
7F：→ xxtomnyxx: 先猜没加染剂 08/05 00:47
8F：→ Ianthegood: 电极插反 旁边load个1kb的看看 08/05 02:49
9F：→ Ianthegood: PCR批不出来的原因太多太多了 胶照不出来的倒是没几 08/05 02:51
10F：→ Ianthegood: 个 08/05 02:51
11F：推 susu8n0: 我猜胶是用水配的 08/05 17:26
12F：→ dasiy3112001: 但是都不是耶！电极也很肯定没插反，也有加dye！胶 08/05 19:00
13F：→ dasiy3112001: 也是用TBE配的，我用这组marker跟loading dye已经跑 08/05 19:00
14F：→ dasiy3112001: 第二次都是ㄧ样空无ㄧ物了…… 08/05 19:00
15F：→ dasiy3112001: 而且我是内染的 08/05 19:10
16F：推 Ianthegood: 确定电源供应器有启动？如果是EtBr内染你照胶的时候 08/05 20:16
17F：→ Ianthegood: 胶下面1/3左右应该会有一条界线 有吗？ 08/05 20:16
18F：推 hsnuyr: dye有跑出来吗？有的话内染的EtBr或是DNA染剂微波完有等 08/06 00:52
19F：→ hsnuyr: 胶稍微冷才加吗？我遇到通常都是太急着加但是温度还太高 08/06 00:52
20F：→ hsnuyr: 所以degrade 08/06 00:52
21F：推 joseph103331: 内染不行就改一下外染 然後跑个plasmid当control 08/06 03:10
22F：推 susu8n0: 跟其他实验室借已包含loading buffer的marker 08/06 14:47
23F：→ sunorange: 给个照片 ，比较好讨论 08/06 20:25
24F：推 yfw: 建议补个图片比较容易判断 一般marker没出来90%是胶没做好 08/07 12:58
25F：→ dasiy3112001: 谢谢大家，我已知道原因了，但都不是大家猜想的哦！ 08/07 19:20
26F：→ leptoneta: 那请问是什麽因素呢? 08/07 20:43
27F：推 kuyar: UV波长不一样吗？ 08/07 23:40
28F：→ Misher: 我猜没开UV光 XDDD 08/08 09:43
29F：→ dasiy3112001: 是我们家不用etbr染计，而是用无毒染计可兼loading 08/08 19:27
30F：→ dasiy3112001: dye用，但新买marker附的dye要外染，所以我很顺手 08/08 19:27
31F：→ dasiy3112001: 的拿来用了，结果就GG 08/08 19:27
32F：→ dasiy3112001: 发现剂打错，歹势 08/08 19:28
33F：→ turtle24: 意思是原本的无毒染剂染不到新买的marker? 要专用的? 08/09 00:51
34F：→ Ianthegood: 他marker里面已经有dye了就没另外再加内染的loading b 08/09 00:59
35F：→ Ianthegood: uffer 08/09 00:59
36F：→ Ianthegood: PCR又刚好没跑出东西 08/09 01:00