作者s908322001 (小负)
看板Biotech
标题[讨论] 关於药物对细胞型态影响的问题
时间Wed Aug 16 15:47:02 2017
各位先知大家好
小弟我目前的主题是找中药治疗肝癌
在测毒性时实验室是用MTT assay 来筛出中药对细胞的IC50
然後再用低於IC50的浓度来做接下来的实验,然後最近的一个问题是
之前做了萤光染色来看F-actin 能否被抑制
结果control组很正常的细胞型态表现
但是在加了1/2 IC50 的组别细胞F-actin明显小於ctrl,
但在核质的大小上明显小於control
而在另一个实验cell poliferation assay 上
在1/2 IC50 组别中, 加药第一天细胞并无增长的迹象
但是在第二天的组别中就掉到跟IC50 同样的数值
我这边是用 MTT 来做的,但是在MTT 1/2 IC50 也有存活率 80% 左右,
而且有一次测poliferation 是忘了做 day0 组, 但是那次的 1/2 IC50 组别又是
完美的 细胞数持平走向
也因此让我怀疑是否这药是可以破坏细胞稳定型态的功能
所以我想问的是,是否有什麽办法可以证明这药可以破坏细胞的附着力或是型态的稳定?
也希望有涉略这方面的先知们能给个关键词之类的让小弟去了解一下相关知识
谢谢各位
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※ 编辑: s908322001 (140.122.136.124), 08/16/2017 15:52:57
1F:推 ampicillin: 一下F-actin一下proliferation最後跳回adhesion 08/16 17:13
2F:→ ampicillin: 也不是说都无关,只是这逻辑也太跳痛了吧 @@ 08/16 17:13
3F:→ blence: 同楼上,实验的操作难意会,实验结果的解读也不好理解 08/16 18:36
对不起啦,这是刚刚meeting 的时候想的,当时思绪不够好阐述一些脑中的问题
http://imgur.com/a/J63AQ 这是萤光染色的图,有一张加药後(1/2 IC50)的
细胞核和质明显变小,学长说这可能是细胞要凋亡的现象,不过在测MTT的时候
1/2 IC50 的细胞存活率却有到快 80%,所以才会想到上面的问题,对不起各位
※ 编辑: s908322001 (140.122.143.253), 08/16/2017 19:50:08
4F:→ williamyang: MTT的结果不等同於apoptosis 08/16 23:28
5F:→ aj1139: 这照片细胞型态也差太多,就算apoptosis时细胞会缩,也没 08/17 06:49
6F:→ aj1139: 有这麽夸张吧。怎麽觉得好像渗透压有问题(乱猜) 08/17 06:50
7F:→ aj1139: 个人建议去确认一下配置药物的buffer、浓度、pH值、温度 08/17 06:51
8F:→ aj1139: 还有这两张图染色时候使用的试剂有没有问题。 08/17 06:52
9F:推 ayenyayaya: 感觉就单纯的不健康要死还没死? 08/18 21:38
10F:→ ayenyayaya: 单纯看adhesion 可以看focal adhesion 的marker 08/18 21:39