作者libidoor (Anti de Sitter)
看板Biotech
标题[讨论] westernblot running gel band 歪斜
时间Tue Aug 22 06:05:06 2017
如题，爬文找资料以後，
觉得还是不清楚问题出在哪里。
最近 band 在靠近 gel 两侧的地方常常往上翘约30-45度。以下是我的条件，还请板上同
仁请教:
Running buffer: 没用过，三周前泡的。
Voltage: 不管是 60 80 110 跑完全程都一样（110有先用低电压跑过线）会歪斜。
Gel: Bio-Rad commercialized protein gel. 都是用新买不到一周。
Sample: 体积固定为 10 或 20 ul， marker 分别为 7 或 14 ul. （之前跑10， 20 或
40 ，marker分别为 7 或14，都没有问题。最近想说歪掉了才调整成10ul，但还是有问题
）
有额外发现到的是最近金属线冒泡比以前多一些，以前80 volt看不太到冒泡，最近80就
像以前120一样冒很多。
不知道以上环节是否哪里最有可能导致 band 歪掉? 还是有其他原因?
谢谢大家!
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签名档
你和那些反年改团体
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1F：→ Ianthegood: 就不要跑最边边两个lane啊 08/22 07:25
2F：→ roy047: 正常 tank电极设计问题 08/22 08:00
3F：→ aj1139: 你用什麽压胶？ 08/22 11:51
4F：→ blence: precast gel还浪费lane很不值得 08/22 12:23
5F：推 joseph103331: 可以试试全程放冰箱+80V左右去跑 08/22 12:59
6F：→ joseph103331: 自制的高趴数胶这样跑都很直很漂亮 08/22 12:59
7F：→ Ianthegood: 老实讲只是要收data的我才不管勒 要发paper的就浪费几 08/22 15:40
8F：→ Ianthegood: 个lane也无妨XD 08/22 15:40
9F：推 aj1139: 啊我笨了，没注意到是precast gel。跑的时候每个lane都有 08/22 16:50
10F：→ aj1139: 东西吗？我建议是两边的lane不要下sample，但要加loading 08/22 16:50
11F：→ aj1139: dye让电场稳定，个人最近才跑过过期三年的precast gel电 08/22 16:50
12F：→ aj1139: 压200V都还OK。如果这样还是有问题，可以找厂商确认，因 08/22 16:50
13F：→ aj1139: 为precast gel...品质不一定一样，可能你那批货有问题。 08/22 16:50
14F：→ aj1139: 。 08/22 16:50
15F：→ Ianthegood: 最常见就是铜线老化嘛 你看铜线最两端是不是有金属堆 08/22 17:30
16F：→ Ianthegood: 积 泡泡醋也许会好一点 08/22 17:30
17F：推 cyc5566: 改成40V 慢慢跑超级直 08/22 22:25
18F：→ chihsiao: 电泳槽那个是白金丝不是铜线 08/24 23:29
19F：推 KoiNoUta: 可是Biorad的precast gel不是建议要用200多V跑吗？你这 09/08 20:03
20F：→ KoiNoUta: 样电压太低了吧 09/08 20:03