作者xy234786 (阿亮)
看板Biotech
标题[求救] 如何更清楚分出band
时间Fri Sep 1 23:43:21 2017
如图，我想要分出21 ,19 , 22kda之蛋白，我用的条件是上胶4%胶(30V)，下胶16%(30mA)
，使用的buffer有分阴阳极，因为参考一篇paper tricine gel的配方去跑的，跑的有点
丑，只看到两条，若想看到第三条，可以怎麽改良呢？
http://i.imgur.com/8OpBddN.jpg
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1F：→ Ianthegood: 更高的% 09/01 23:57
2F：→ milkpa: 更低的A/V，略低的蛋白质浓度，well的大小 09/02 10:47
3F：推 joseph103331: 用低温去跑 设备允许可以试试用更长的胶跑 09/02 22:21
4F：→ blence: 这图完全不像16% protein ladder该有的样子,这gel不是没跑 09/02 23:38
5F：→ blence: 开到底,就是配制有误或非鲜配;可以google survivin图参考 09/02 23:42
6F：→ blence: 前面#1PUWW0Kx提到用12%跑,还比这篇的ladder拉得更开 09/02 23:57
7F：→ xy234786: survivin? 09/03 10:50
8F：→ jsi: 楼楼上在说啥? 09/03 22:24
9F：→ Ianthegood: isotype吧 09/03 22:36
10F：推 joseph103331: 真的是survivin，是一种抗凋亡蛋白质(是说名字就很 09/04 01:31
11F：→ joseph103331: 有这种感觉了) 09/04 01:31
12F：→ joseph103331: 大小刚好是本文提到的，所以应该有很高的参考价值 09/04 01:32
14F：→ xy234786: 我翻了实验室之前的论文，大概就要做到这样 09/05 00:27
15F：→ aj1139: 虽然本文是问怎麽把band跑开，但看到之前的data，我建议 09/05 07:09
16F：→ aj1139: 不要用SDS-PAGE，这三个多肽太接近了。跑个液相层析之後 09/05 07:09
17F：→ aj1139: 送去打mass比较好。 09/05 07:09
18F：推 uouim: 推荐用12% Bis-Tris 的预制胶搭配 MOPS buffer。 09/10 23:56
19F：推 jockersung: 16或20%胶试试 然後设60-80V慢慢跑看看 09/18 21:08