作者xy234786 (阿亮)
看板Biotech
标题[求救] 跑胶band弯弯的
时间Thu Sep 14 13:59:40 2017
https://i.imgur.com/XxZYzHY.jpg
这是我western图，不知道为何有些band会歪掉，不是一条直线，是跟跑胶时的电压有关
吗？我是上胶60V，下胶100V在跑，transfer200V一个小时。
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1F：→ bj59420: 跑的时候里面可能有漏buffer? 09/15 12:17
2F：推 rbcajyh: 左右是不是有空一格well没有load东西？这样很容易没有平 09/15 15:51
3F：→ rbcajyh: 衡band歪掉 09/15 15:51
4F：→ xy234786: 不过我有八个sample加marker，用大的齿梳，会无法避免 09/15 21:45
5F：→ xy234786: 用到旁边的well 09/15 21:45
6F：推 iyorain: 下面胶感觉融了 transfer100v80分钟试试 09/15 23:16
7F：推 twnndnpdnc: 冰宝有换吗？ 09/16 23:12
8F：→ xy234786: 我没试过100V 80min transfer效果好吗？ 会不会tran不过 09/17 23:41
9F：→ xy234786: 去 09/17 23:41
10F：→ xy234786: lab的冰宝是都没有换 因为也没其他的qq 每次tran完是都 09/17 23:43
11F：→ xy234786: 满烫的 所以主因可能就是过热吗？ 我是都埋在冰里tran.. 09/17 23:43
12F：→ xy234786: . 09/17 23:43
13F：推 joseph103331: 这麽小不会过不去的，我们都用94V而已，100kDa也是 09/18 03:08
14F：→ joseph103331: 1h就过(10% gel)，高趴数的胶要久一点。 09/18 03:08
15F：→ xy234786: 我的是18%胶 建议用多久呢 09/18 22:00
16F：→ aj1139: sample够用的话，而你又想跑漂亮，给你一些自己troublesh 09/19 07:28
17F：→ aj1139: oot的方法。同时跑两片胶，跑完之後看ladder有没有跑好看 09/19 07:28
18F：→ aj1139: ，选一片好的做WB，另一片染CBR相互对照。有怀疑步骤中的 09/19 07:28
19F：→ aj1139: 细节就一次改一个条件去抓。另外，transfer buffer不要。 09/19 07:28
20F：→ aj1139: reuse，不然只会越跑越慢、越跑越烫。 09/19 07:28
21F：→ aj1139: 顺带一提，你transfer的电压不太可能上得去200V，如果硬 09/19 07:30
22F：→ aj1139: 催上去，胶应该也融化了吧 09/19 07:30
23F：推 westernblot5: 温度太高也有可能 我们会埋在冰里面再拿去4度冰箱 09/05 22:35
24F：→ westernblot5: 里面跑 我们机器统一是在4度里面 09/05 22:35