作者xy234786 (阿亮)
看板Biotech
标题[讨论] loading control
时间Fri Sep 29 01:20:34 2017
我使用这家的beta-actin做为loading controlhttps://www.scbt.com/scbt/product/bet
a-actin-antibody-c4 第一次尝试去针对阴道鞭毛虫做western，跟据上面
说明书的比例分别以1比200,1比500,1比1000去hide 结果如下
https://i.imgur.com/Ji9j2HF.jpg
出来这样很丑的结果，我想请问可能是选错loading control吗？又或是比例上的错误导
致这样的结果?
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc), 来自: 115.82.145.199
※ 文章网址: https://webptt.com/cn.aspx?n=bbs/Biotech/M.1506619238.A.446.html
1F：→ turtle24: marker也呈色吗？二抗太浓？ 09/29 04:40
2F：→ Ianthegood: 不觉得是二抗耶 那个lane外面都满乾净的 可能是PAGE 09/29 05:01
3F：→ Ianthegood: 本来就跑很糟XDDD 09/29 05:01
4F：推 elelith: 你确定这个ab有认阴道鞭毛虫的actin吗 09/30 06:34
5F：→ xy234786: 建议二抗用多少呢？ 10/01 19:39
6F：→ xy234786: 不确定 只是拿实验室唯一的抗体来做 (实验室没有人在做w 10/01 19:41
7F：→ xy234786: estern)，没人知道能不能hide到，我也没有学长学弟妹@@ 10/01 19:41
8F：→ xy234786: paper上都不太会写control 抗体的厂商 也不知道怎麽买， 10/01 19:43
9F：→ xy234786: 老师说要补这个control 就好了 应该可以写论文了... 只 10/01 19:43
10F：→ xy234786: 是卡了一个多礼拜了 10/01 19:43
11F：→ Ianthegood: 良心建议 去找一个专门做蛋白质的lab请他们顺手帮你跑 10/01 19:56
12F：→ Ianthegood: 一张胶 10/01 19:56
13F：→ xy234786: 我再跑了一次胶 并分别人我的目标蛋白抗体与beta-actin 10/02 23:43
14F：→ xy234786: 去hide 10/02 23:43
17F：→ xy234786: 结果beta-actin还是没有band 10/02 23:44
18F：→ xy234786: 我也想 可是大家都蛮忙的 没人会理你的 老爸又不在 只好 10/02 23:52
19F：→ xy234786: 来这问问看 10/02 23:52
20F：→ xy234786: 老板 10/02 23:53
21F：→ turtle24: 可以printscreen,再加上一些标示，只看上面那张还以为你 10/03 01:59
22F：→ turtle24: 成功了 10/03 01:59
23F：→ turtle24: 改了什麽条件吗，只是重跑不可能从很脏变成没有band啊 10/03 02:00
24F：推 elelith: actin是几乎零失败率的 我觉得不是跑胶的问题 你可以考虑 10/03 04:09
25F：→ elelith: 染ponceau 这也是很普遍的loading control 10/03 04:09