作者kaofei (phoebe)
看板Biotech
标题[求救] 有人将ligation mix不小心冻去-20过吗
时间Wed Oct 4 21:49:05 2017
如题
我其实是想放4度的，但那时候脑袋转太快在思考之後chloroform extract的流程，就不
小心把mix放去-20了……
一个小时後想想不对赶快拿出来，但已经结冻了QQ
之後解冻了tapping一下才放去4度
不知道这样的意外对ligation效率的影响多大
稍微思考过，觉得也许不会到很灾难, T4 应该不会因此去活，buffer也不会坏掉
比较怕DNA断掉或ATP量下降之类的
但当然还是要等明天跑胶或downstream application一run才知道
我知道像我这样脑残不容易…但还是想问问有没有人有类似经验的
谢谢orz
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1F：→ blence: 不管是ligase,buffer,ATP,DNA,分开放时哪个你不是放-20? 10/04 22:02
2F：→ kaofei: 我也是这样想的…，但实在是没发生过类似的事所以有点紧张 10/04 22:12
3F：→ kaofei: orz 10/04 22:12
4F：→ chldoug: 但是ligase在-20度的时候不会结冻，配完mix再冻会变性啊 10/05 09:36
5F：→ turtle24: 加了酵素不立刻上机？ 10/05 14:13
6F：→ kaofei: 我放4度作用，都直接丢冷藏…只是那时候想太快以为自己要c 10/05 20:29
7F：→ kaofei: hloroform extraction了…就进-20了 10/05 20:29
8F：→ huuban: 然後结果呢~有接上吗? 10/05 23:36
9F：→ kaofei: 有耶 好像影响不大，觉得走运… 10/06 15:13