作者ABULA666 (ABULA)
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标题Re: [讨论] PCR问题
时间Thu Nov 16 18:45:52 2017
下午时有被原PO站内信问了一些,
想想觉得把部分节录出来跟大家分享比较好,
类似的问题就请不要说爬文爬不到啊啊啊。
部分我有稍微修改给大家易於阅读。
问题:
想再问一下,在联合医事检验所中
https://goo.gl/HT8wDp
提到HCV属於RNA病毒,
那联合只用real-time PCR的话,
这样会准确吗?
回答:
先说一下网页的内容好了,
这网页的real-time PCR应改为
real-time RT-PCR (reverse transcription-polymerase chain reaction)
在临床上常用来评估病毒在人体内的含量,
但此法通常用在确认步骤中,
常规上还是以侦测Anti-HCV抗体或HCV抗原为初步筛检(screening test)。
因real-time RT-PCR是利用PCR中primers对到HCV RNA genome的序列,
因此准确度(accuracy,true positive result)和灵敏度(sensitivity)
通常会比一般的免疫法还要好。
PCR主要是将DNA片段放大之後由仪器侦测後推估原本检体的DNA量,
但又因HCV是RNA genome,
必须利用reverse transcription将RNA转成DNA才可以进行PCR,
这也是为什麽我肯定测HCV一定是用RT-PCR,
因为目前没有办法直接以PCR放大RNA。
但有一些像transcription-mediated amplification之类的方法可放大RNA片段,
而现今在临床上的应用还是没有比RT-PCR好用、技术门槛也比较高。
至於官网的错误应该是负责网页资料的人疏忽,
一般医检师还是认得出来是指real-time RT-PCR。
如果你是某个实验需要此data,
还是建议你找好你的厂牌是什麽、
你所需要侦测的检体是什麽、
测得的数据要定何种范围为阳性,
这些都会影响到你验出HCV的数据判读,
还有你自己有没有厂商的阳性对照组和阴性对照组来确认你的检验流程是可信的。
你可能有不同的需求,又加上你的背景不是这个...
我想很难有人有办法回答你。
简单来说,这方法用在HCV是准确的,但临床上通常会搭配其它检验多次确认。
每个方法都会伴随不同的真阳性值和真阴性值。
※ 引述《kk013579 (kk)》之铭言:
: 小弟想请教一下
: RT-PCR跟
: real-time pcr是一样的东西吗?
: 另外real-time pcr可以侦测到rna病毒吗?
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