作者bridge850108 (bridgez)
看板Biotech
标题[求救] patch clamp问题请教
时间Sat Dec 23 18:48:20 2017
版上各位先进好，
一样是先前在版上询问的专讨论文内容还有疑问，
google了也无法理解因此想请教各位。
测量植物离子通道实验时使用patch clamp技术
例如从-145mV~+35mV
增加电压区间为+30mV，60秒测一次
我想问：
1、控制电压去测量电流的目的是什麽？观测到的资料可以对离子通道做什麽推测？我猜
测是利用像V=IR去计算通道电阻来推断通道开阖状态，不知道是否正确。
2、请问为什麽要从-145~+35mV做多次不同电压测量？不同电压的目的是什麽呢？
3、还有想问为什麽测量钾离子通道时多从-216mV左右开始测到+60mV左右结束，而测阴离
子通道时多从-145mV开始+35mV结束呢？请问这电压的差距有生理上的意义吗？
4、实验时bath solution含有30mM CsCl，而pipette solution含有150mM CsCl(其他还有
MgCl2、CaCl2、MES、EGTA、HEPES)，请问实验是利用氯化物浓度差来造成跨膜电位差以及在离子流出时维持电压在
在holding potential的吗
5、作者说了'whole-cell slow-type anion currents'这个说法，我以为whole-cell是纪
录整个细胞的状态，请问为什麽还能针对单一S-type anion channel检测电流呢?
6、别篇文献提到了'Currents were identified as slow anion currents by
their kinetics and reversal potential'，可是这句话的出处文献没有发表，教授也问
了作者是如何辨认其为S-type而非R-type anion channel?
https://imgur.com/q1TTUbC
所以我也随便(跪)找了一张图，a~d为S-type，e、f为R-type，想请先进们简略解释两种
channel在图表上的差异。
文献
https://goo.gl/RY5rqQ
小弟资质驽钝应该有非常多地方理解错误，
烦请各位解惑，
非常感谢!
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1F：→ july81212: 1.概念上没错也可反过来控制I测V 主要是要看R(channel) 12/25 02:44
2F：→ july81212: 3.一般Vm<150 K+与hyperpolarization跟repolarization; 12/25 02:50
3F：→ july81212: anion与repolarization有关 12/25 02:51
4F：→ july81212: 4.维持holding potential 12/25 02:55
5F：推 july81212: 6.差异在activation time S-type(s) R-Type(ms) 12/25 02:59
6F：→ july81212: R-type在靠近正常Vm时关得快导致没有Current呈现Vshape 12/25 03:04