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大家好 最近在收新鲜肿瘤组织抽genomic DNA,之後预计做bisulfite conversion和NGS 我是将组织常温保存於RNAlater (Thermo fisher) 并在4小时内就进行DNA抽取 选用的kit为Genedirex DNA isolation kit (tissue) 在RNAlater到货前,组织是用snap freezing的方式保存 按照kit的protocol做,260/280及260/230皆在理想范围内 但昨天开始用RNAlater保存组织後,将组织从RNAlater夹出後进行相同DNA extraction步 骤 但做出来的260/230只有1.2左右 我怀疑是RNAlater造成,在处理过程中,原本澄清的上清都变得很混浊......column的膜上 还有大量白色结晶(如图) 找过资料与官网建议,组织从RNAlater取出後,用kimwipe尽量吸乾多余RNAlater 我今天照这方法试过 260/230为1.6 过程中的上清仍混浊,column中一样有白色结晶(但比昨天少了些) 实在是很苦恼 想请教该如何解决RNAlater造成的260/230过低的问题, 谢谢大家! https://i.imgur.com/GZoohn1.jpg --



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1F:推 jabari: https://goo.gl/UXm37T 看来是通病 改用etoh吧 01/14 03:30







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