作者migu0531 (migu0531)
看板Biotech
标题[求救] 融合细胞
时间Mon Jan 15 10:54:34 2018
最近在做小鼠脾脏细胞和NS1细胞融合。
使用RPMI1640+L-glutamine+15%fbs+1%抗生素+sodium pyruvate
融合一阵子了，用elisa筛选阳性的细胞从96>48>24>6孔盘。
取一点点细胞去做极限稀释，上礼拜五看融合细胞还持续分裂，就补了100ul的培养液，
今天一早发现细胞状态不好，有些已经开始变小不圆，感觉再过几天就往生了……
其他的细胞就扩养到小角瓶，原本在6孔盘长的好好的，扩上去觉得细胞状态也不好，一
堆细胞飘起来和死掉……
现在完全不知道该怎麽办，为甚麽突然死掉那玛多?
继代是抽一半，补一半medium。请问在细胞没满的情况下，继代有需要把细胞冲起来吗？
想问问各位前辈们，可否提供一些方法和经验~
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1F：→ williamyang: 通常不是会用HAT做筛选吗? 01/16 00:17
2F：→ Invec: HAT then HT 过程中如果细胞死掉就真的无缘了 (污染除外) 01/16 00:46
3F：→ Invec: 通常HAT筛选中 个人习惯不加抗生素 待clone稳定後才补回去 01/16 00:52
4F：→ migu0531: 有喔～已经用过HAT，再做eliss挑阳性孔 01/22 21:51