作者stephilow ()
看板Biotech
标题[求救] 基转後农杆菌无法根除
时间Wed Jan 31 17:31:29 2018
想请问一下，
我做植物的基因转殖，
是用农杆菌感染的转殖方式。
植物材料是桉树跟菸草无菌苗的叶片。
感染後两天叶片周围会长出细菌，
我加入cefataxin和carbcillin清洗後，
发觉菌量会暴增，之後怎麽洗也很清除乾菌。
最後是菌量过多掩盖叶片，然後叶片就烂掉死了...
请问有甚麽方法可以解决?(做了一年都没成果)
如果是菌种污染，有甚麽方法可以可以解决?
谢谢
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1F：推 Ianthegood: 组培吗？ Ti plasmid的resistance gene是什麽？ 01/31 18:28
2F：→ huuban: 可能感染结束之後没有洗乾净吧? 02/01 00:24
3F：→ huuban: 有菌冒出来就很难救了啊... 02/01 00:25
4F：→ stephilow: 觉得农杆菌超难洗... 也用超音波震荡，但植物组也死了 02/01 09:42
5F：→ huuban: 唔..那可以请问您都是怎麽洗的吗? 02/02 00:20
6F：→ huuban: 或者也可能是感染时间太长，菌长上来了 02/02 00:28
7F：→ huuban: 菸草的话..我记得感染3-5分钟，无菌水洗三次，抗生素一次 02/02 00:29
8F：→ huuban: 无抗生素的培养基培养48小时，然後换到有抗生素的培养基 02/02 00:30
9F：→ huuban: 参考中研院转殖植物核心实验室>实验方法>转殖实验 02/02 00:35
10F：→ stephilow: 感谢解答! 中研院的资料外人可以查阅? 02/03 00:50
11F：→ stephilow: 另外，菸草叶片很薄，会先pre-culture吗? 02/03 00:52
12F：推 huuban: 可以唷，中研院的这个资料是完全公开的~ 02/04 23:16
13F：→ huuban: 请问pre-culture是甚麽 > <? 02/04 23:17
14F：→ huuban: 我习惯用50 ml离心管洗，无菌水30 ml，用力摇100下 02/04 23:18