※ 引述《HPLC (高效能液相层析仪)》之铭言： : 标题: [实验] HPLC Column 压力之问题 : 时间: Mon Dec 12 11:02:44 2011 : 大家早安~~ : 小弟我呢 现在赖以为生的HPLC半制备耐水项C18管柱 : 现在压力变好大QAQ : 有机项去冲洗 压力跟以前差不多 : 但是换到水项 压力变得好大好大QAQ : 以前全水项1.8 mL/min 压力是60 kgf/cm^2 现在已经快破百了= =" : 我也用ACN冲了两天了 (0.2 mL/min): : 还是没用 请有经验的大大可以帮忙小弟我吗= =" : 我也打给Sales了 他说 先打打看 如果图跟以前差很多 : 那 只能放弃那只管柱 死马当活马医 用逆洗 : 可是我觉得逆洗 感觉挺危险的 = =" : 管柱10 × 250 mm 5 μm : 先谢谢各位大大们噜~ : : : -- :

※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc) : ◆ From: 163.17.15.25 : 推 dk191726:用1:1(ACN/H2O) 洗看看 12/12 11:27 : → dk191726:逆洗没差拉 自己在坯管子也会这样洗 12/12 11:28 : → HPLC:那 D大 你是如何逆洗的?? 12/12 11:41 : 推 kalen123:有没有可能是滤头阻塞，如果单是管塞的话应该有机相也挂 12/12 12:47 : → HPLC:没接Column的背压没问题 正常 12/12 12:49 : 推 tony15899:水有换吗, 滤过的水还是会长微生物的 12/12 13:55 : → shiaobau:水项的管路都固定那条吗?? 是的话 不上column 洗一下管路 12/12 14:06 : → HPLC:水一个礼拜我就会换新的 最多两个礼拜 12/12 14:09 : → HPLC:怎麽洗管路?? 可以教一下吗@@? 12/12 14:10 : 推 ricky40711:降不下时也会逆洗，反接管柱1:1洗看看吧 12/12 15:26 : → ricky40711:如果rate用1.8 ml/min洗，洗约15分钟就好，勿太久 12/12 15:27 : 推 tony15899:水你没加甚麽添加剂就只是水的话 还是常换吧 12/12 16:14 : → HPLC:水最多一个礼拜 0.05% TFA 最多两个礼拜 12/12 17:16 : → HPLC:那我假设 如果长微生物的话 那该怎麽办呢??? 12/12 17:39 : 推 tony15899:2-3天换水吧 12/12 18:54 : → HPLC:那 微生物只会卡在 solvent 的滤投那里吗??? 12/12 20:48 : → HPLC: 头 12/12 20:48 : → tony15899:没有遇过 不过有听说很久以前发生过线路(?)塞住 12/12 22:49 : → tony15899:然後是透明滑滑状的东西 12/12 22:50 : → HPLC:所以有没有需要 把有机溶剂 像 MeOH 换到 C D项 冲?? 12/12 22:57 个人是这麽想的: 问题拆开来:管柱、帮浦、degaser、管线 一项一项来看。 (一)如果问题单是出在管柱上的话， 无论是水相或有机相， 你都应该观察的到压力昇高的状况， 但显然并非如此; 要进一步确认的方法: 你可以将已经确认压力正常的有机相管线换成水相後重跑一次， 这时有两个状况。 ------------------------------------- 状况1:压力正常 这说明与管柱无关， 此时你可以把先前的水相溶液换成此时跑的溶液， 如果跑出来压力正常的话代表你先前跑的水相溶液遭到污染或是置换， 问题解决。 如果跑出来压力仍然异常的话， 跳到下一项:管线。 ------------------------------------ 状况2:压力异常， 则问题指向管柱内有某种东西与水作用後，造成压力异常昇高 (虽然我没见过这种事，降低倒是有看过)， 那就洗洗看能不能把东西反冲出来吧， 不行的话跳到最後一项。 ------------------------------------ (二)下一个是管线(含滤头) 如果管柱的疑虑排除了， 你可以直接把到帮浦的前端管线拆下来洗一洗， 甲醇、丙酮、MeCN、热水都可以试试， 记得最後要用二次水冲乾净， 确保没有残留就好。 洗完之後拿起来看看管柱里面有没有异物， 没有的话再装回去， 用先前的条件试试， 如果还是不行的话跳到下一步。 (三)再来是帮浦或degasser有没有可能故障， 确定方法很简单， 在排除了管线、管柱的可能後， 你要做交叉测试。 --------------------------------------------- 用已知正常的pump接头和异常管线的pump接头交换; 比方说如果故障的水相是接pump的A端， 那就把管线交换成C端後重跑水相， --------------------------------------------- 如果交换後正常的话代表pump的A端已经故障， 看你们家老板想不想修。 degasser也是一样 但要作笔记， 测试完後要交换回来， 不然日後会发生溶液混错的问题。 此外在进行上述操作时要注意溶液相溶性的问题。 (四)如果以上作法还是不行 把机台关掉， 电源切掉， 在上面放包椰子口味乖乖 然後打电话给经销商的工程师， 死缠烂打的请他务必来看， 这已经不是个人能解决的问题了。 --

※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc) ◆ From: 140.114.213.26 ※ 编辑: kalen123 来自: 140.114.213.26 (12/13 00:01)