各位化学前辈们好 小弟我是师大化学分析组的硕班学生 目前实验室是液相层析搭配质谱仪的领域 小弟我负责的仪器是Agilent 1100 nano pump 由於是做蛋白质体学领域的研究 因此使用的HPLC与管柱都是nano等级的 比较特别的是我们实验室的毛细管管柱都是自己packing的 C18管柱 3um 小弟目前遇到的问题是这样的 这问题纠结了半年之余 实在摸不着头绪才来这边请教： 学理上而言 HPLC流动相为水相(H2O)时 压力会较高 流动相为有机相时（ACN) 压力会相对较低 因此当冲提方式为梯度冲提时 压力的走向基本上要与梯度走向相反才是 但是小弟接上自己packing的管柱测试 使用的流速为0.3uL/min 系统的压力随着有机相梯度的拉升也跟着拉升 100%水相大约120bar 100%有机相来到约180bar 为了确认不是仪器本身的问题 小弟有借来一支市售管柱做测试 0.5mmx150mm 流速开到20uL/min 梯度压力非常正常 水相70bar 有机相20bar 鬼打墙的是为何自己的管柱就行不通 材质粒径都一样只是内径不同 更神奇的是这是实验室的技术 历届学长姐都是用这个方法做实验 怎麽到我这就问题连连 想请教各位化学人帮忙集思广益找出小弟实验的盲点 谢谢指教！ --

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