作者a1508 (ardor)
看板Chemistry
标题[学科] HPLC-DAD与质谱仪定量问题
时间Mon Jan 22 14:02:55 2018
https://i.imgur.com/HQWSNCI.jpg
从table可以看到 都是用Standard curve的标准曲线进行定量 为什麽LC/DAD的定量效果比LC/MS/MS还好
就结果论来说 LC/MS/MS是後两者定量方法是比较准确的 基质效应的原因我还能理解 但是Standard curve却是不好的
这个问题困恼我一阵子了 谢谢各位
第一次po文 请见谅
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1F:推 jeff79723: 这张表格感觉就是说有基质效应,後两种方法都是可以改 01/22 21:58
这样解释是合理的 但是利用HPLC-DAD却没有基质的影响 就是我困恼的电
2F:→ jeff79723: 善基质效应的方法。standard curve会有基质效应(样品浓 01/22 21:59
3F:→ jeff79723: 品浓度偏低,即可看出)主因是标准品(standard curve) 01/22 22:00
4F:→ jeff79723: 没有基质造成无法反应基质对於讯号的影响。 01/22 22:01
5F:→ a1508: 因为没有基质的影响 标准品在纯buffer中的讯号不应该比较高 01/23 10:28
6F:→ a1508: 吗? 01/23 10:28
※ 编辑: a1508 (111.83.162.168), 01/23/2018 14:05:55
7F:→ tony15899: DAD特定波长是对化合物有选择性的侦测 01/23 14:41
DAD是这样没错 但是LC-MS/MS 利用标准品拉标准曲线(溶在丙酮) 因此不会受到基质的影响 但是定量的结果是比较差的
8F:→ tony15899: 该波长没有吸收的物质就不出峰 干扰小很多 01/23 14:42
9F:→ tony15899: 基质干扰也不一定是减少讯号强度 01/23 14:47
※ 编辑: a1508 (111.83.162.168), 01/23/2018 15:58:52
10F:→ a1508: 补充一下我的疑问点 DAD的部分已经了解了 谢谢各位 01/23 16:22
11F:→ a1508: 一个是用 standard curve拉的标准曲线 01/23 16:22
12F:→ a1508: 一个是用 standard addition method 拉的标准曲线 01/23 16:22
13F:→ a1508: 从结果来说 真实样品带入 standard curve是比较差的 01/23 16:22
14F:→ a1508: 带入 standard addition method却是比较好的 01/23 16:22
15F:→ a1508: 单纯只是因为基质效应问题吗? 01/23 16:22
16F:→ tony15899: 标准曲线本身没问题 但是样品有基质干扰 01/23 17:01
17F:→ tony15899: 那标准曲线当然就不适用 01/23 17:01
18F:→ tony15899: 就图来看,基质干扰可能使样品中的待测物讯号强度降低 01/23 17:02
19F:→ tony15899: 标准添加是加到样品里面 理论上较佳 01/23 17:07
20F:推 jeff79723: standard addition method 通常被用来确认基质效应 01/23 20:30
21F:→ jeff79723: LC/MS/MS一般认为选择性很好,但是质谱中样品transfer 01/23 20:30
22F:→ jeff79723: 的动作很多,每个步骤(离子化等)都可能因为样品基质造 01/23 20:31
23F:→ jeff79723: 成基质干扰。 01/23 20:34
24F:推 jeff79723: 其实对於基质干扰...我也有疑问。是否只能从经验/实验 01/23 20:37
25F:→ jeff79723: 得知/判断。有办法看到样品就预先知道可能会有基质干扰 01/23 20:37
26F:→ jeff79723: 吗?XDDD 01/23 20:37
27F:→ tony15899: 所以样品前处理很重要 但还是有一堆paper在那边 01/23 20:49
28F:→ tony15899: 我有MS我用SIM就不用前处理好棒棒 01/23 20:50
29F:→ a1508: 谢谢tony与jeff的回答! 01/24 10:47