作者Navarro (......)
看板Chemistry
标题[实验] Aldehyde-Hydrazide 产物对热的稳定度
时间Sat Mar 24 04:19:02 2018
各位先进大家好,最近研究欲利用 aldehyde-hydrazide 反应修饰3'端RNA,简易步骤如下:
1. 用sodium periodate将3'端相邻OH基氧化成aldehyde
2. size-exclusion column分离出RNA
3. 加入hydrazide-cy3(cyanine dye)与RNA反应
4. 用sodium cyanoborohydride将hydrazone还原成单键
5. 乙醇沉淀後测HPLC
想请教此反应产物对热的稳定度如何,由於实验需求将RNA加热至70度,再测HPLC时发现dye脱落了(约1-2小时完全与RNA分离)。
目前已知hydrazone在高温(> 40)的稳定度不佳,但重复实验、也试过不同步骤结果仍相同。因此想借助各位对化学键的敏锐度,看看是否产物的稳定度是否足以承受高温。谢谢。
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